基因克隆和DNA分析第七版电子版PDF下载最新去水印版|百度网盘下载

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基因克隆与DNA分析第七版讲解基因克隆、基因表达、PCR、基因组学等分子生物学基本技术原理,生动介绍基因克隆和DNA的实际应用在基础研究、医学、农学、法医学等方面的分析。第7版在大家关心的生物制药、基因治疗、转基因作物等方面做了很多扩展。

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质粒的分类

天然存在的质粒最有用的分类是基于质粒的主要特征,而这些主要特征又基本上由质粒的基因决定。按照这种分类方法,质粒分为以下五类:

(1)生育力质粒或F质粒,仅携带转移基因,除促进质粒间性结合转移外没有其他特性,如大肠杆菌中的F质粒。

(2) 耐药质粒或R质粒携带的基因可以赋予对一种或多种抗菌剂的耐药性,例如对氯霉素、氨苄青霉素或汞的耐药性。 R质粒在临床微生物学中很重要,因为它们是通过正常繁殖传播的,可以对细菌感染的治疗产生深远的影响,例如RP4,它通常存在于假单胞菌中,但也可以在其他细菌中出现。< /p>

(3) Col质粒编码colibactin,一种可以杀死其他细菌的蛋白质,如大肠杆菌的ColE1质粒,

(4)降解质粒使宿主菌能够代谢一些通常不可用的分子,如甲苯和水杨酸,如恶臭假单胞菌中的TOL质粒。

(5) 毒力质粒赋予宿主细菌致病性,如根癌农杆菌 (Agrobacterium tumefa-

ciens) Ti质粒(Ti质粒),可诱导双子叶植物冠薄瘤。

细菌以外的生物体中的质粒

虽然质粒在细菌中无处不在,但在其他生物体中却不太常见。在真核状态下最具特征的质粒是在酿酒酵母菌株中观察到的 2 um 质粒 (2 um cirele)。 2 um 质粒的发现是非常幸运的,因为人们可以从中构建载体来转化酵母这种非常重要的生物。然而,对其他真核生物(如纤维霉菌、植物和动物)中质粒的研究已证明令人失望,这表明许多高等生物细胞似乎并不适合放置质粒。

溶原性噬菌体

与裂解性感染相比,溶源性感染的特点是在宿主细胞中稳定存在噬菌体 DNA 分子,可能在数千次细菌细胞分裂之后。对于许多溶原性噬菌体,噬菌体 DNA 作为附加体插入插入到细菌基因组中。这种整合形式的噬菌体 DNA [称为原噬菌体] 是一种不感染的静止状态,而携带原噬菌体的细菌 [这里是溶原菌

(溶原菌)] 通常在生理上与未感染的细菌细胞无法区分。然而,原噬菌体最终从宿主细胞基因组中释放出来,噬菌体恢复为裂解形式,细胞被裂解以释放后代噬菌体。图 2.7 所示的进入噬菌体 [lambda())] 的感染周期是典型的溶原性噬菌体感染周期。

一小部分溶原性噬菌体经历完全不同的感染周期。当 M13 或相关噬菌体感染大肠杆菌时,新的噬菌体颗粒不断组装并从宿主细胞中释放出来。 M13 DNA 没有整合到细菌基因组中,因此不会变得静止。对于这样的噬菌体,永远不会发生细胞裂解,受感染的细菌会继续生长和分裂,但速度比未受感染的细菌慢。

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