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细胞与分子免疫学实验技术主要介绍免疫血清的制备、免疫球蛋白的纯化、标记及应用;免疫细胞的分离技术、免疫荧光染色和流式细胞仪分析、淋巴细胞增殖功能和杀伤功能的测定、细胞因子的生物学活性和免疫学方法的检测;同时简要介绍了生物传感器在免疫学中的应用

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简介

本书全面而具体地介绍了现代细胞和分子免疫学中常用的实验技术。主要包括免疫血清的制备、免疫球蛋白的纯化、标记和应用;免疫细胞分离技术、免疫荧光染色和流式细胞仪分析、淋巴细胞增殖和杀伤功能测定、细胞因子和免疫细胞的生物学活性。同时简要介绍了生物传感器在免疫学中的应用。每种实验技术在简要说明其理论基础的同时,对实验技术步骤、试剂和设备、注意事项等都一一进行了说明。本书适用于免疫学及免疫学相关研究生的实验指导或课题研究,对基础免疫学和临床免疫学的研究也具有参考价值。

免疫血清的制备

免疫血清的制备是一种常用的免疫学实验技术。高滴度、高特异性免疫血清可作为免疫诊断试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可用于特异性免疫治疗。免疫血清的效价取决于实验动物的免疫反应性和抗原的免疫原性。如果用免疫原性强的抗原刺激高反应体,往往可以获得高滴度的免疫血清;而用免疫原性较弱的抗原进行免疫时,应同时加入佐剂以增强抗原的免疫原性。免疫血清的特异性主要取决于免疫所用抗原的纯度。因此,为了获得高度特异性的免疫血清,必须提前对抗原进行纯化。此外,免疫方案,包括抗原剂量、免疫途径、免疫次数、抗原注射间隔等,也是影响免疫血清效价的重要因素。

免疫血清的制备原理

具有免疫原性的抗原可刺激相应的B细胞增殖、分化为浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同抗原决定簇被具有不同特异性的B细胞克隆识别,因此某种抗原刺激机体后产生的抗体实际上是针对抗原分子表面不同抗原决定簇的抗体混合物(即,多个克隆抗体)。此外,由于记忆 B 细胞和记忆 T 细胞参与二次反应,抗体产生的特征在于回忆反应。在基础免疫的基础上,反复注射免疫原不仅可以获得高滴度的抗体,同时由于抗体亲和力的成熟,抗体的亲和力可以显着提高。

新型免疫佐剂(小鼠用)ImmunoEasy的应用

佐剂是非特异性免疫增强剂。种类繁多,如卡介苗、脂多糖、氢氧化铝、砚台、矿物油,以及近年来应用的脂质体和CpC寡核苷酸等。佐剂主要通过延长抗原在体内(如矿物油和明矾等)的保留时间和非特异性增强机体对特定抗原(如单磷酸盐和CpG寡核苷酸)的免疫反应来增强机体对抗原的反应。对抗原的免疫反应。弗氏完全佐剂结合了这两种机制。 ImmunEasy是一种新型的小鼠免疫佐剂,主要成分是CpG寡核苷酸。与传统弗氏佐剂相比,ImmunEasy具有高效、安全、使用方便、节省抗原、省时等优点。

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