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细胞实验指南与广受好评的冷泉港实验室出版社的《分裂克隆实验指南》和《抗体》两本实验指南具有相同的特点,即使是经过多年的工作。经验研究人员也非常有用,本书是从事生命科学各个领域工作的人的参考。

细胞实验指南 Vol.1 + Vol.2 电子书 PDF 下载

简介

本书由冠国冷泉港实验室邀请的125位专家共同研讨撰写。是最新最权威的细胞实验综合操作指南。许多技术和方法已被证明是有效的,它们由三个主体组成:细胞培养及其生化分析、光学显微镜、基因及其产物的细胞结构和亚细胞定位。本书内容丰富,包括从无脊椎动物到脊椎动物的细胞基础培养方法、细胞器的分离和生化分析、光学和电子显微镜水平的蛋白质定位、共聚焦、去卷、多光子显微镜技术的最新进展,蛋白质动力学研究在活细胞中,以及一系列最先进的蛋白质和大分子复合物的微观研究方法,单拷贝基因及其转录本的定位和原位杂交等。是组织实验室不可或缺的生物学研究,甚至任何生命科学实验室。

为什么要使用培养箱?

培养细胞可以是具有光学、液体和温度控制能力的任何结构,可以是简单的培养皿、培养瓶或复杂的专用活细胞环境系统。

使用传统的衍射限制光学方法观察生物体的单个活细胞非常困难,有时甚至是不可能的,因此必须在分离培养物中研究细胞。

必须在平坦、透明的表面上研究样品。

还必须有一个液体保持结构来保持适当体积的液体介质。

可能需要灌注以维持 pH 控制、去除废物和添加改变细胞生理的试剂

微环境的物理特性

使用开放式系统时,需要注意以下特性:体积、通光孔径、材料、底座厚度、几何形状、蒸发和浓度、环境光、视角和生物相容性。

在选择封闭系统时,需要考虑以下特性:固定或可变体积、光学表面分离、灌注特性、体积交换率、层流、剪切力和流道几何形状。

鸡胚背根神经节的分离

最广泛使用的培养系统之一是从胚胎背根神经 (DRG)、背根神经节和

它被称为感觉神经节,它起源于神经,由多能祖细胞的转移和分化形成(Harrisun 1924)。与成纤维细胞和雪旺细胞一样,DRG 中有两种类型的神经元,分别负责神经生长。因为和大脑

针对源生长因子(综述参见 Davis 1988),内在方法是基于早老的。从DRG中分离出的神经元具有易于维护、大小合适(细胞体大小为10-35 m)、可低密度培养等优点。

应用于生长锥形态、细胞粘附分子、细胞器转运、神经再生、髓鞘形成和细胞骨架

分析和其他相关研究领域(Smith 等人 1994;Theng 等人 1994;Dai 和 Sheetz 1995:Honig 和 Kurter 1995;Letourneau 和 Wire 1995;Schmidt 等人 1995;Shewan 等人 1995;stan et al.1996; Straube-West et al.1996)

选择鸡胚作为分离神经元的材料有很多原因:不需要杀鸡取胚,受精卵相对便宜。

容易获得,动物护理只需要加湿的培养箱,H可以根据Hamburger和Hlariton(1951)提出的胚胎发育指导方针准确判断胚胎发育阶段,获得相对纯的神经元只需2小时.

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